对新冠病毒(Covid-19)的起源目前没有定论,将来估计对新冠病毒起源的追溯也会不了了之。今天,全球死于新冠病毒的人数达到108,834,全球感染冠病毒有1,780,406人。全世界的科学家们基于人类生物安全的目的研究人类致病病毒,但是事与愿违的是,科学家们已经或者、正在制造了危害全人类的魔鬼病毒。2015年的12月,一组中美科学家在世界著名的《自然医学》杂志上发表了一篇引起极大关注的文章。表明科学家们能人工组装病毒、合成病毒的科研论文不可胜数,但是,没有任何一篇研究论文象此篇文章在发表时间、参与的科学家和研究单位、文章的研究对象上,是如此的与目前正在大爆发的新冠病毒密切有关。此篇研究论文也充分证明,魔鬼般冠状病毒完全可以在实验室中人工制造。
1,文章的题目,《流行在蝙蝠中的一个萨斯类似病毒群显示潜在的人类危机》(A SARS-like cluster of circulating bat coronaviruses shows potential for human emergence),在目前正在全球爆发的Covid-19疫情危机就足以令人心惊胆战。
2, 参与此项研究的单位有9个, 分别是:a,北卡罗莱纳州大学流行病学系;b,北卡罗莱纳州大学微生物学和免疫学系;c,阿肯色州毒理研究、食品和药物使用北方中心;d,中国科学院武汉病毒所,特殊病原体和生物安全国家重点实验室;e,北卡罗莱纳州大学生物和生理学系;f,北卡罗莱纳州大学囊性纤维化中心;g,瑞士生物医学研究所、Bellinzona微生物研究所;h,哈佛医学院癌免疫学、艾滋病和Dana-Farber癌症研究所;i,哈佛医学院医药系。参与此项研究的科学家也多达15名。其中所列通信作者有两位,第一位是来自北卡流行病学系的Vineet D Menachery,也是第一作者;第二位是来自北卡罗莱纳州大学微生物学和免疫学系的Ralph S Baric,在文章中排名最后。15名作者中有两位中国的科学家,其中石正丽教授是名列14位。这篇科学论文可以说是世界科学家们合作的科研成果。
3,此项研究报告的众多结果中,来自中国科学家的具体贡献(图1)仅仅是:Ge Xing-yi负责了病毒的假(伪)型化实验(具体指改造自然病毒的序列以达到安全性、可操作性和病毒靶向性等目的);石正丽负责提供SHC014病毒刺蛋白序列和质粒载体。
4,文章摘要重点:a, 严重型急性呼吸综合症病毒(SARS-CoV,萨斯病毒)和中东型综合症病毒(MERS-CoV)表明此类病毒可以跨种感染,此研究是探索来源于蝙蝠的萨斯类似病毒(命名为SHC014-CoV)的致病性(图2);b, 人工合成了开米拉病毒(chimeric virus, 嵌合病毒/融合病毒)。即小鼠版萨斯病毒嵌合了蝙蝠病毒的刺突蛋白;c, 嵌合病毒的其中一种(2b型),可以识别原代培养的人类呼吸道细胞上的受体,ACE2酶(血管紧张素转换酶);可以在人类呼吸道细胞内高效地复制。而且,体外实验的复制效率类似于引发大流行的萨斯病毒;d, 动物体内实验表明,该嵌合病毒在小鼠肺叶中可引起明显病理变化;e, 对该嵌合病毒研究表明,基于萨斯病毒的免疫疗法和预防性疗法对该病毒的效果不明显(图3)。萨斯病毒单克隆抗体和萨斯病毒疫苗均未能去除嵌合病毒,或者都未能预防嵌合病毒的感染;g, 人工地重造了在体内体外均能复制的、有感染能力的嵌合型全系列病毒(SHC014);此研究表明,该蝙蝠病毒虽然目前只是在蝙蝠中存在,但是该蝙蝠病毒有潜在的、能引发类似萨斯病毒疫情的能力。
5,结果:a, 此文章是石正丽等在2013年发表在《自然医学》的研究结果的继续,是从发现蝙蝠病毒到研究蝙蝠病毒致病能力的延伸研究(图4);b, 嵌合病毒、或者杂交病毒,是在小鼠版的萨斯病毒上,装上一个有着人畜共患能力的来自蝙蝠的刺突(S)蛋白,即该新型刺突蛋白的序列来自蝙蝠(制造了第一个魔鬼);c, 该杂交病毒能够用来研究此新型刺突蛋白引起疾病的能力,并且可以用来评估该新型刺突蛋白的致病性,以及其致病性与病毒其它的、非自然突变的非相关性。
6,结果:a, 有二个蝙蝠病毒(SHC014和RsWIV1)的全序列和萨斯病毒的全序列最接近,但是,有些重要的不同序列是位于刺突蛋白中(图5);b, 二个蝙蝠病毒中的RsWIV1病毒中,其识别人ACE2受体的刺突蛋白序列和萨斯病毒上的刺突蛋白序列相比,有14个氨基酸的差异。差异包括5个至关重要的氨基酸Y442、L472、N479、T487和Y491;d, 但是,这些差异都不影响蝙蝠RsWIV1病毒的结合ACE2受体的能力(图6);随后,另一个蝙蝠病毒SHC014的刺突蛋白识别人类、果子狸和蝙蝠ACE2受体的能力得到证实。e, 四种有效的抗萨斯S蛋白的抗体(图7),对构建的杂交病毒SHC014的效果很差。不论是用DIV(双灭活全萨斯病毒)免疫的方法,还是用接受了DIV的动物的血清,不能保护接种杂交病毒的年老小鼠,而且我们观察到DIV有致病性(图8)。
7,结果:a,前面结果表明,通过蝙蝠的刺突蛋白可感染人细胞和引起小鼠致病;b, 我们接下来合成了含有蝙蝠SHC014病毒全序列的克隆。合成的蝙蝠SHC014病毒在绿猴肾表皮(Vero)细胞的成功复制。但是,我们的其它研究表示,该合成蝙蝠病毒需要进行改造,才能达到与萨斯病毒相匹配的、在人呼吸道细胞和小鼠中所具有的复制能力和致病性(第二个魔鬼不完美啊!)(图9)。
8, 结果:a, 在萨斯爆发时期,有一个最常见的假设是,萨斯病毒来源于蝙蝠,然后通过感染果子狸,病毒在受体结合域(RBD,位于刺突蛋白上)有了提升突变,从而可以感染果子狸ACE2。萨斯病毒最后通过人类在活动物市场的、和果子狸而受到感染;b, 由于蝙蝠病毒的RNA序列,比果子狸病毒的RNA序列,更加接近萨斯病毒的序列,因此第二个假设是:人和蝙蝠的亲密接触导致蝙蝠病毒感染人;c, 我们的研究结果显示了有第三个可能:即蝙蝠存在有一个大的病毒群,群里刺突蛋白多种多样;蝙蝠病毒无需突变和适应,就有可能感染人。我们提出的蝙蝠病毒感染人的第三个假设图示如下:
9,论文致谢部分:a, 研究由美国国立过敏和感染性疾病研究院(NIAID)、美国国立衰老研究院(NIA)和美国国立卫生研究院(NIH),中国自然科学基金,以及国际生态健康联盟(Z.L.S.)资助;b, 所有全序列和嵌合型SHC014病毒的实验,是在美国NIH颁布“暂停资助 ‘获得性功能(GOF)’ 研究”前完成;其它实验的进行获得了NIH的批准。(博文说明:所有资料来自公开信息,并致谢。)